jest amerykańską aktorką głosową. Jej głosem padły m.in. Hayley Smith w animowanym programie telewizyjnym American Dad!, którego twórcą, Seth MacFarlane, jest jej starszy brat, Najwyższy Przywódca Numbuh 362 w serialu telewizyjnym Codename: Kids Next Door oraz Kate Lockwell w grze wideo Starcraft II. Oprócz aktorstwa głosowego MacFarlane zajmowała się także innymi aspektami animacji, takimi jak bycie kierownikiem produkcji w filmach The Grim Adventures of Billy & Mandy oraz Welcome to Eltingville, a także napisała odcinek The Grim Adventures of Billy & Mandy zatytułowany „Educating Grim”. Wczesne życie MacFarlane urodził się w Kent w stanie Connecticut. Jej rodzice, Ronald Milton MacFarlane (ur. 1946) i Ann Perry (z domu Sager, 1947–2010), urodzili się w Newburyport w stanie Massachusetts. Jej starszy brat jest reżyserem, animatorem i aktorem Sethem MacFarlane (ur. 1973). Rodzice MacFarlane`a poznali się w 1970 roku, kiedy oboje mieszkali i pracowali w Bostonie w stanie Massachusetts, a pobrali się jeszcze w tym samym roku. Para przeniosła się do Kent w 1972 roku, gdzie Ann rozpoczęła pracę w biurze przyjęć w szkole South Kent. Później pracowała w Biurze Poradnictwa i Rekrutacji College`u w Kent School, selektywnej szkole przygotowawczej do college`u, w której Ronald był także nauczycielem. MacFarlane studiował w Konserwatorium Bostońskim, ale nie ukończył studiów przed przeprowadzką do Los Angeles, aby rozpocząć karierę aktorki głosowej. Kariera MacFarlane po raz pierwszy zaczęła udzielać głosu postaciom w programach Hanna-Barbera, w tym w Johnnym Bravo, kiedy przeprowadziła się do Los Angeles w Kalifornii. Następnie, po zakończeniu pracy z Hanną-Barberą, MacFarlane zaczęła podkładać głos wielu postaciom w Cartoon Network. Oprócz aktorstwa głosowego MacFarlane zajmowała się także innymi aspektami animacji, na przykład była kierownikiem produkcji w filmach The Grim Adventures of Billy & Mandy i Welcome to Eltingville oraz napisała odcinek The Grim Adventures of Billy & Mandy zatytułowany „Educating Grim” – gdzie poznała także swojego męża. Seth MacFarlane poprosił ją o pomoc przy jego nowym pilocie dla Fox Broadcasting Company, który stał się Family Guy. Przez kilka lat pozostawała przypadkowym członkiem obsady Family Guy, a także pracowała zarówno dla The Walt Disney Company, jak i Cartoon Network. W 2005 roku zagrała w filmie American Dad!, w którym podkłada głos Hayley Smith, zbuntowanej nastoletniej córce głównego bohatera Stana Smitha. MacFarlane nadal regularnie współpracuje z Family Guy. We wrześniu 2012 roku wydała swój pierwszy album Hayley Sings, będący jazzowym hołdem wokalnym dla Hayley Smith, jej bohaterki w programie American Dad!. MacFarlane i jej mąż Spencer Laudiero opublikowali także książki obrazkowe dla dzieci. Życie osobiste 16 lipca 2010 roku matka MacFarlane`a, Ann Perry Sager, zmarła na raka. O jej śmierci poinformował Larry King w swoim programie Larry King Live.